琥珀酰輔酶A (Succinyl coenzyme A)是一個(gè)琥珀酸與輔酶A的組合物。琥珀酰輔酶A在琥珀酸硫激酶的作用下,高能硫酯鍵水解,能量轉(zhuǎn)移給GDP生成GTP和琥珀酸。生成的GTP可直接利用,也可將其高能磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移給ADP生成ATP。
琥珀酰輔酶A檢測(cè)通?;谄湓谔囟l件下的化學(xué)或物理性質(zhì)。在檢測(cè)過程中,樣品中的琥珀酰輔酶A會(huì)被分離并定量測(cè)定。常用的檢測(cè)方法包括高效液相色譜法(HPLC)和液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)(LC-MS)等。
檢測(cè)方法
(1) 高效液相色譜法(HPLC)
原理:利用HPLC分離琥珀酰輔酶A,并通過紫外或質(zhì)譜檢測(cè)器進(jìn)行定量分析。
步驟:
樣品預(yù)處理:離心、過濾去除雜質(zhì)。色譜分離:使用C18反相色譜柱,流動(dòng)相為乙腈-水或甲醇-水體系。
檢測(cè):使用DAD檢測(cè)器在特定波長(zhǎng)下檢測(cè)琥珀酰輔酶A的吸光度。特點(diǎn):靈敏度高、準(zhǔn)確性好,適合復(fù)雜樣品分析。
(2) 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(LC-MS/MS)
原理:結(jié)合液相色譜的分離能力和質(zhì)譜的高靈敏度,實(shí)現(xiàn)琥珀酰輔酶A的定性和定量分析。
步驟:
樣品提?。菏褂糜袡C(jī)溶劑提取目標(biāo)物。色譜分離:通過LC分離目標(biāo)物。質(zhì)譜檢測(cè):使用質(zhì)譜檢測(cè)器進(jìn)行定量分析。
特點(diǎn):靈敏度高,可同時(shí)檢測(cè)多種代謝物。